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“谢谢师父。”方子业也不富裕,就不敢有多余想法了。
袁威宏则摆了摆头:“嗯!”
“经费要好好用,精打细算,该节省的地方可以节省,但不该节省的,千万不能省,严格保证无菌原则,移液管虽然贵,但该用就用,保证实验流程的严谨性。”
“省钱不是这么省的,最主要的是要把这个课题的结果做出来,稍微推动一丢丢科学的门缝儿,这就是我们拿着国家给的钱,该做的事情。”
“还有就是,揭翰如今的科研底蕴非常深厚,他申请市级、校级课题起来,与你的底蕴也都差不多,所以他后续啊,也可能会为我们团队多拿一点钱。”
“一个是课题经费,一个是课题数量,这都是好东西。”
“有钱才能好做事。”袁威宏与方子业说着,不能对外道的话。
……
门诊结束,方子业并未多耽搁,帮忙袁威宏放了白大褂后,就直接去了实验室里。
邓勇教授那边的团队虽然大,但洛听竹并不特殊,所以她没有做实验的经费,需要自己去努力,前期研究,既然求到了袁威宏这里,袁威宏还应下来了。
那么方子业作为袁威宏团队里的成员,能帮忙自然要尽量帮忙,否则的话,袁威宏也要亲自来实验室。
而,方子业来到实验室里的时候,就发现,洛听竹一直就守在实验室,从下午的两点一直到下午的六点。
比任何人都要担心实验的进度。
她做申请课题的前期实验的经费都不多,因此容不得丝毫的浪费和大意。
“方师兄,我觉得这个培养皿已经差不多可以计数了,您来看一下?”洛听竹在看到方子业到后,赶紧站起,同时把无菌检查手套、一次性套装口罩等,都已经给方子业备好。
“嗯,好,吃饭了吗?”
“我们要不先点一个外卖?”方子业进来之后,一边问。
“已经点了的,师兄。”洛听竹点头,表示自己的后勤工作做得非常到位。一心只想着细胞宝宝以及实验。
transwell实验后,就是要进行细胞计数,以客观的数据来表示肿瘤细胞的侵袭能力。
因是前期实验,因此只需要用直接计数法即可。
然后,即便是直接计数法,仍需要一定的实验步骤,才能相对客观反应——
先固定好细胞,不再让其移动。
用镊子小心取出小室,吸干上室培养基,用棉签轻轻擦拭Matrigel和上室内的细胞。取新的24孔板加入4%多聚甲醛600μL,将小室放入后固定20-30min。
然后再进行细胞染色!
取出小室,吸干上室固定液,移到预先加入约800μl0.1%-0.2%结晶紫的孔中染液的孔中,染色15-30min。除去未与细胞结合的结晶紫,用棉签轻轻擦拭小室的上侧,将非特异性结合于小室上表面的染料擦掉,以便后续镜检计数……
这一步,方子业非常期待,因为不管是别人的细胞实验,还是自己的,只要自己发现了,而且参与了实验,肯定就有学识点的收益!
两人转战到显微镜前…
*注:本文中涉及到的一些实验步骤,一部分是经简化版本,主要是完全一股脑地放上来,懂的人倒是看懂了,大部分人都没看懂,考虑到大部分书友的感受,大家看个大概即可。
总结:transwell实验是检测肿瘤细胞侵袭能力的,通过技术表示侵袭能力强弱,操作不算简单,但是一种证明能力的工具。
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